瓊脂糖凝膠怎麼配製
瓊脂糖凝膠的配製是分子實驗室比較基本的操作,因此正確地操作對整個實驗來講很有必要,大體流程如下:稱量、熔膠、倒膠、拔梳。
1、稱量 我們通常所説的0.8%、1%的膠都是指的質量體積分數,即所稱取的瓊脂糖粉的質量克比所加的TBE緩衝液的體積毫升即膠的濃度。緩衝液的體積根據膠板的大小而定。如小膠板0.8%的膠需要瓊脂粉0.104克,TBE13毫升;
2、熔膠 將所稱量的瓊脂粉與TBE在錐形瓶中混合,在微波爐內反覆加熱2到3次至瓊脂粉溶解並無氣泡;
3、倒膠 乾淨的膠槽內擺好梳子,往膠內滴加1uL左右核酸染料,混勻,待冷卻至不燙手,輕輕倒入膠板內。
4、拔梳待大約20分鐘後,輕輕拔掉梳子若不好拔,可以滴加適量的TBE緩衝液。
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