細胞融合的基本原理和方法
1、病毒誘導助融:
細胞融合在自然界是存在的,細胞融合研究首先也是基於自發的細胞融合,1957年,岡田善雄意外發現仙台病毒,能誘導懸液中艾氏腹細胞融合,然後Harris、Kada等用於誘導種間細胞融合,獲得成功。
2、化學助融:
1972年,卡爾森首先用硝酸鈉進行菸草兩個種的細胞原生質體的融合,1974年Kao等首先發現聚乙二醇能誘導植物細胞原生質體融合產生雜交細胞。1975年Pentecorvo,發現聚乙二醇亦能幫助哺乳類動物細胞的融合,1976年Davidson更進一步證實這一結果,並且認為其具有簡單快速、高效率等優點。因而,1975年之後聚乙二醇就逐漸取代了仙台病毒.
3:電融合法:
電融合法是70年代未期和80年代初期發展起來的一種新的細胞融合方法。Senda在1970年首先應用電脈衝,通過微電極在顯微鏡下使植物細胞融合,奠定電融合技術基礎。
4、鐳射誘導卵細胞融合:
鐳射誘導卵細胞融合是最新的細胞融合方法,該法為張聞迪等人首先應用,他們利用鐳射微束的單色性、高功率密度、短脈寬和極小的作用範圍等特點。對泥鰍受精卵進行融合試驗,獲得成功,且融合後的細胞可存活發育,經卵裂期、囊胚期、原腸期、孵化期、直至幼魚。整個過程可通過顯微鏡觀察,還可同時由電視攝象監視器觀察和進行照相記錄。.
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