劃線分離時要注意哪些

劃線的形式有多種，可將一個平板分成四個不同面積的小區進行劃線，第一區（A區）面積最小，作為待分離菌的菌源區，第二和第三區（B、C區）是逐級稀釋的過渡區,第四區（D區），則是關鍵區，使該區出現大量的單菌落以供挑選純種用。為了得到較多的典型單菌落，平板上四區面積的分配應是D>C>B>A。

注意事項：

平板不能倒得太薄，最好在使用前一天倒好。為防止平板表面產生冷凝水，倒平板前培養基温度不能太高。用於平板劃線的培養基，瓊脂含量宜高些，否則會因平板太軟而被劃破。用於劃線的接種環，環柄宜長些，環口應十分圓滑，劃線時環口與平板間的夾角宜小些，動作要輕巧，以防劃破平板。為了取得良好的劃線效果，可事先用圓紙墊在空培養皿內畫上4區，並用接種環練習劃線動作，待通過模擬試驗熟練操作和掌握劃線要領後，再正式進行平板劃線。