rpa技術原理
rpa技術原理:
rpa全稱為:RecombinasePolymeraseAmplification,即重組酶聚合酶擴增。重組酶與引物結合形成的蛋白-DNA複合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發生鏈交換反應形成並啟動DNA合成,對模板上的目標區域進行指數式擴增。被替換的DNA鏈與SSB結合,防止進一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進行得非常快,一般可在十分鐘之內獲得可檢出水平的擴增產物。
重組酶聚合酶擴增(RecombinasePolymeraseAmplification,RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術。RPA技術主要依賴於三種酶:能結合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常温下也有活性,最佳反應温度在37攝氏度左右。
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