crisprcas9的原理

此係統的工作原理是crRNA（CRISPR-derivedRNA）通過鹼基配對與tracrRNA（trans-activatingRNA）結合形成tracrRNA/crRNA複合物，此複合物引導核酸酶Cas9蛋白在與crRNA配對的序列靶位點剪切雙鏈DNA。而通過人工設計這兩種RNA，可以改造形成具有引導作用的sgRNA（singleguideRNA），足以引導Cas9對DNA的定點切割。

作為一種RNA導向的dsDNA結合蛋白，Cas9效應物核酸酶是已知的第一個統一因子（unifyingfactor），能夠共定位RNA、DNA和蛋白，從而擁有巨大的改造潛力。將蛋白與無核酸酶的Cas9（Cas9nuclease-null）融合，並表達適當的sgRNA，可靶定任何dsDNA序列，而sgRNA的末端可連接到目標DNA，不影響Cas9的結合。因此，Cas9能在任何dsDNA序列處帶來任何融合蛋白及RNA，這為生物體的研究和改造帶來巨大潛力。