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pcr的知识

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  • PCR与测序反应的异同点

    PCR与测序反应的异同点

    相同点:都是基于碱基互补配对原则,在DNA聚合酶作用下的聚合反应。不同点:1、反应过成不同。PCR是引物对扩增,测序则是单引物扩增。2、反应成分不同。PCR是需要4种脱氧碱基,测序则有ddNTP。...

  • 生化PCR名词解释

    生化PCR名词解释

    PCR:全称是聚合酶链式反应,是一种分子生物学技术,用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。在该反应中,使用与目的DNA序列互补的寡核苷酸作为引物,进行多轮的DNA合成。其中包括DNA变性,引物退火和在TapDNA聚合...

  • 荧光定量pcr是检查什么

    荧光定量pcr是检查什么

    荧光定量pcr是检查支原体衣原体感染的一个检查,它主要是通过PCR原理来检测,是否有过多的支原体衣原体出现感染。实时荧光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)...

  • PCR名词解释

    PCR名词解释

    聚合酶链式反应简称PCR(英文全称:PolymeraseChainReaction) 是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简...

  • 什么是PCR技术的非特异性扩增

    什么是PCR技术的非特异性扩增

    “PCR”技术的非特异性扩增:指进行PCR扩增出来的条带不是所需要的,且引物与模板在非目的条带处有错配,导致延伸产物不是目的条带。非特异性扩增在琼脂糖电泳时可以看到在目的条带外出现了其他条带。引起非特异性扩增的原...

  • 镁离子在PCR中的作用

    镁离子在PCR中的作用

    镁离子在PCR中的作用是与dNTP、核酸骨架相互作用,影响Polymerase的活性。镁离子浓度对PCR扩增效率影响很大,浓度过高可降低PCR扩增的特异性,浓度过低则影响PCR扩增产量,甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带;一般镁离子的浓度...

  • 关于PCR产物的理解

    关于PCR产物的理解

    PCR有两种解释:1:RT是”逆转录“这项技术使用的”逆转录酶“来自逆转录病毒,是一种能按照碱基互补配对原则,以脱氧核糖核苷酸为底物,以寡居dT为引物,把mRNA转换成相应DNA的酶,由于该酶的效果与中心法则顺序相反,故而有”逆转...

  • pcr技术获取目的机的原理

    pcr技术获取目的机的原理

    pcr技术获取目的机的原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于靶序列两端互补的寡核苷酸引物。并且每完成一个循环需要2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。基因(遗传因子)是产生一条多肽链或功能RNA所...

  • 猫pcr检查是什么意思

    猫pcr检查是什么意思

    猫PCR检查是指聚合酶链式反应,也就是将微量的DNA扩增到可检测程度的一种医疗操作手法。所以一般用这种方法来确诊DNA病毒,同时也可以通过这种监测方法来监测病毒的复制程度,即疾病程度。也就是说对于核酸为RNA的病毒,PCR...

  • PCR的高保真酶都有哪些啊

    PCR的高保真酶都有哪些啊

    常见的高保真酶有Pfu,PfuUltra,但是我用过最好用的高保真酶是Phusion.因为一般的高保真酶因为有外切酶的活性,虽然提高了保真度,但是扩增效率会降低,所以用Pfu的时候,往往需要扩增时间要比Taq酶长,PfuUltra好一些。但是都难...

  • PCR原理

    PCR原理

    PCR原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性...

  • 荧光定量pcr原理

    荧光定量pcr原理

    荧光定量pcr原理:利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团。实时荧光定量PCR是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物...

  • pcr是什么意思

    pcr是什么意思

    pcr全称是PolymeraseChainReaction,是聚合酶链式反应,在一些情况下又称无细胞分子克隆、特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。PCR技术的基本原理:该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依赖于DNA聚合酶...

  • 什么是实时荧光定量pcr

    什么是实时荧光定量pcr

    实时荧光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。Real-timePCR是...

  • 菌液PCR可靠吗

    菌液PCR可靠吗

    菌液PCR用来鉴定构建好的克隆或者亚克隆是可靠的。PCR体系小一些也是可以的,只要注意,菌液的量一定不能过多,一般10微升的PCR体系中,加入过夜培养的菌液只需0.5微升。或者当菌在培养板上生长出来的时候,用灭菌牙签或者枪头...

  • 影响PCR扩增结果的因素

    影响PCR扩增结果的因素

    1、引物:引物到用户手头前都是以干粉形式存在的,干粉很容易丢掉,引物溶解后可以测定一下OD,将所有引物的浓度调整到一致,对实验有一定帮助。2、高温聚合酶:高温聚合酶是非常稳定的,除非有蛋白酶的污染。但是不同公司提供的酶...

  • 为什么PCR反应会有平台期

    为什么PCR反应会有平台期

    PCR存在平台期的常见原因是底物耗尽或多次循环后polymerase失活,反应速率下降,但是即使底物量趋于无限,酶活稳定,PCR也会有平台期,因为PCR反应本质上也是一个酶促反应。它也会有化学平衡,也服从勒夏特列原理。当DNA合成速率...

  • pcr实验室面积是否有严格要求

    pcr实验室面积是否有严格要求

    pcr实验室标准如下所示:1、PCR实验室分为四个区域,不同的工作区域使用不同的工作服。离开各工作区域时,不得将工作服带出。2、各实验室在入口处设缓冲间,以减少室内外空气交换。试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界...

  • 如何进行pcr引物设计

    如何进行pcr引物设计

    原理:PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否。原则:引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。产物不能形成二级结构。引物长度一...

  • pcr实验员为什么工资那么高

    pcr实验员为什么工资那么高

    pcr实验员工资高是因为工作难度高,并且需要长时间的盯着工作程序。PCR是聚合酶链式反应的简称,是一种酶促化学反应,可以在试管里将待测的目的基因在很短的时间内扩增五十万倍乃至上百万倍,大大提高了基因诊断的灵敏度,降低...

  • pcr实验室是几级实验室

    pcr实验室是几级实验室

    按SICOLAB常做的PCR实验室是设置为C级,D级也有做过,按不同客户要求而定吧。目前国家标准没有明确规范PCR实验室洁净等级,而是说要有洁净等级。Pcr实验室又叫基因扩增实验室。PCR是聚合酶链式反应(PolymeraseChainReactio...

  • PCR的用途有哪些

    PCR的用途有哪些

    PCR的用途有:1、核酸的基础研究,基因组克隆;2、不对称PCR制备单链DNA用于DNA测序;3、反向PCR测定未知DNA区域;4、反转录PCR用于检测细胞中基因表达水平、RNA病毒量以及直接克隆特定基因的cDNA;5、荧光定量PCR用于对PCR产物...

  • PCR技术的原理是什么

    PCR技术的原理是什么

    PCR技术的原理是依赖于与靶序列的寡核苷酸引物。PCR技术其实是一种体外的DNA产生扩增的技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将需要被扩增的DNA的片段与其两侧互补的寡核苷...

  • pcr技术原理

    pcr技术原理

    pcr技术原理:DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,...

  • 二次PCR什么意思

    二次PCR什么意思

    二次PCR,即聚合酶链式反应。是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,二次PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。因此,无论是化石中的古生物,或是历史人物的残骸,甚至是几十年...

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