基因表達載體構建步驟

操作步驟如下：

1、用一定的限制酶切割質粒，使質粒出現缺口，露出黏性末端；

2、再用同一種限制酶切斷目的基因，使其產生相同的黏性末端；

3、將切下的目的基因的片段插入質粒的切口處；

4、再使鹼基互補配對結合，兩個黏性末端吻合在一起，鹼基之間形成氫鍵；

5、再加入適量的DNA連接酶，催化兩條DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵，從而將相鄰的脱氧核糖核酸連接起來，形成一個重組DNA分子。